Comparision of different cell cultures for replication of infectious laryngotracheitis virus from chickens

Abstract

A propagação do vírus da laringotraqueíte infecciosa tem sido descrita usando culturas de células primárias derivadas de fígado e rim de embrião de galinha ou ovos embrionados, entretanto, essas culturas necessitam de ovos livres de patógenos específicos (SPF) que tomam tempo e custam caro. Desta maneira, culturas de células de linhagem são mais fáceis de manter em laboratório e conduzir os experimentos. A propagação do ILTV foi avaliada em cinco diferentes cultivos celulares: chicken embryo related cells (CER), que é uma linhagem híbrida derivada de fibroblasto de embrião de galinha e BHK-21; a linhagem Vero, derivada de células de rim de macaco verde africano; HD11, uma linhagem de células de macrófagos de galinha; CEC- 32, uma linhagem de fibroblasto de ave; e um cultivo primário de fibroblasto de embrião de galinha (CEF). O efeito citopático foi observado até 96 horas pós-inoculação e a presença do DNA viral foi realizada por PCR. Os cultivos de linhagem HD11 e CEC-32 não propiciaram a propagação viral e os cultivos celulares de CEF e Vero, como previamente descrito, mostraram ser permissíveis à replicação do VLTI. Os resultados também demonstram que a linhagem celular CER também pode ser utilizada para o isolamento e replicação do VLTI.

The propagation of infectious laryngotracheitis virus (ILTV) has been described using primary cell cultures derived from chicken embryo liver and kidney or embryonated eggs, but these cultures use Specific Pathogen Free (SPF) eggs that are time and cost expensive. Since cell line cultures are easier to maintain in laboratory conditions, the growth of ILTV was evaluated in five different cell cultures: chicken embryo related cells (CER), a cell hybrid derived from chicken embryo fibroblasts cells and BHK-21; Vero, from African green monkey kidney cells; HD11, a chicken macrophage cell line; CEC-32, an avian fibroblast cell line and a primary cell culture of chicken embryo fibroblasts (CEF). Cytophatic effect was observed until 96 hours following inoculation and the detection of the viral DNA was performed by PCR. The HD11 and CEC-32 cell lines did not support the virus growth but CEF and Vero, as already described were permissive cultures for propagation of ILTV. The results also showed that the CER cell line can be used for primary isolation and replication of ILTV.