Avaliação da permeação/retenção cutânea in vitro de formulações semissólidas comerciais contendo aciclovir e estudo de sua relação com a concentração antiviral efetiva

Abstract

Avaliar a permeação/retenção cutânea de formulações semissólidas em pele animal pode ser útil para complementar a equivalência farmacêutica destes produtos. O aciclovir (ACV) é um fármaco derivado da guanosina, com alta especificidade para o vírus herpes, disponível no mercado nacional sob forma de creme dermatológico de vários fabricantes. O objetivo do trabalho foi a avaliação da permeação/retenção cutânea in vitro de formulações comerciais contendo ACV (referência, genérico e similar – dois lotes de cada), com determinação da concentração do fármaco no tecido cutâneo, nas duas principais camadas, para correlacionar com a concentração antiviral efetiva. Os estudos foram conduzidos utilizando células de Franz e pele suína. Primeiramente, foi validado o método analítico para a quantificação do fármaco nas formulações e, principalmente, nas camadas da pele suína. As análises foram conduzidas em cromatógrafo a líquido de alta eficiência, com coluna C8, detecção em 254 nm e fase móvel constituída de uma mistura de água:metanol (95:5, v/v). A metodologia analítica demonstrou ter adequada sensibilidade (LQ 0,38 μg/mL), especificidade e recuperação do fármaco a partir das matrizes biológicas na faixa de 85 – 102%. Quanto ao estudo de retenção cutânea in vitro, o produto genérico, do primeiro lote analisado forneceu quantidade de fármaco na pele (1,56 ± 0,65 μg de ACV/mg de tecido) que apresentou diferença estatisticamente significativa em relação ao referência e similar (0,85 ± 0,40 e 0,88 ± 0,43 μg/mg, respectivamente), enquanto que no segundo lote todos os produtos apresentaram similaridade de penetração (p>0,05) (referência - 0,74 ± 0,45; genérico - 1,25 ± 0,90 e similar - 1,23 ± 0,85 μg/mg). Para compreender se estes resultados e sua variabilidade poderiam trazer comprometimento ao efeito terapêutico, foi realizada uma simulação empregando um modelo de efeito inibitório para replicação viral. Com esta avaliação pode-se verificar que os produtos analisados ofereceriam efeito antiviral desejado no tecido cutâneo, mesmo em contato com cepas de Herpes simples de IC50 elevado.

Evaluate the permeation/retention of semisolid formulations in animal skin could be useful to supplement the pharmaceutical equivalence of these products. Acyclovir (ACV) is a guanosine derivative drug with high specificity for the herpes vírus. The objective was to evaluate the skin in vitro permeation/retention of commercial formulations containing ACV (reference, generic and similar - two batches each) with determination of drug concentration in the skin tissue in different layers to correlate with effective antiviral concentration. Studies were conducted using Franz cells and porcine skin. Was validated analytical method for quantification of the drug in the formulations and layers of pig skin. Tests were conducted in high performance liquid chromatograph, eqquiped with C8 column, UV detection at 254 nm and the mobile phase consisted of a mixture of water: methanol (95:5, v/v). The analytical methodology has demonstrated good sensitivity (LOQ 0.38 mg/mL), and specific, with drug recovery from biological matrices in the range of 85-102%. As for the study of skin retention in vitro, the generic product (1.56 ± 0.65 ACV/mg of tissue), the first batch analysis showed a significant difference from the reference and similar (0.85 ± 0.40 and 0.88 ± 0.43 μg/mg, respectively), while in the second batch all products showed similar penetration (reference - 0.74 ± 0.45; generic - 1.25 ± 0.90 and similar - 1.23 ± 0.85 μg/mg). To understand whether this difference could bring change in therapeutic effect, a simulation was performed using an inhibitory effect model for viral replication. With the simulation study, it may be suggested that the formulations analyzed would provide wanted antiviral effect even in contact with Herpes simplex strains of high IC50.