Avaliação do efeito do tratamento crônico com 17β-estradiol em ratas ovariectomizadas submetidas a estresse em um modelo de isquemia in vitro de fatias hipocampais

Abstract

Estudos demonstram que mulheres no período pré-menopausa exibem menor susceptibilidade à isquemia que homens e mulheres pós-menopausa, com idades equivalentes. Isso se deve provavelmente aos maiores níveis circulantes de estrógenos, principalmente 17 b-estradiol. O objetivo do trabalho foi investigar o efeito do tratamento crônico com 17 b-estradiol em fatias hipocampais de ratas ovariectomizadas (ovx) submetidas a estresse e expostas a um modelo in vitro de isquemia (privação de oxigênio e glicose - POG). Ratas adultas, ovx, receberam implantes subcutâneos de cápsulas de silastic contendo 17 b-estradiol a 5% ou veículo oleoso, sendo subdividas em controles e estressadas (contenção 1 h/dia, 35 dias). Fatias hipocampais desses animais (400 mm) foram pré-incubadas por 15 min a 37 °C. Após, as fatias controle permaneceram na incubadora e as POG foram incubadas em câmara de anóxia a 37 °C por 60 min. Posteriormente, ambos grupos foram incubados por 3 h a 37 °C (re-oxigenação). A lise na membrana celular foi quantificada pela liberação da enzima lactato desidrogenase (LDH). Com o tratamento, houve redução significativa da liberação de LDH pós-insulto, indicando um efeito neuroprotetor. Com o estresse, observou-se um aumento da liberação de LDH em relação aos respectivos controles. Esses resultados sugerem que o hormônio teve efeitos neuroprotetores nesse modelo, mas não foi capaz de reverter o efeito do estresse.

Several studies show that men and women differ with respect to the incidence of brain ischemia: premenopausal women have fewer strokes than observed in age-matched men. The purported neuroprotection in premenopausal women may be associated to higher level of circulating estrogens, mainly 17 -estradiol. The target of this work was to examine the effect of the chronic treatment with 17 -estradiol in ovariectomized (ovx) female rats submitted to stress against an in vitro model of ischemia in hippocampal slices (OGD – oxygen and glucose deprivation). Female adult rats, ovx, received subcutaneous implants with silastic capsules that contained 5 % 17 -estradiol or the oil vehicle. They were subdivided in a control group and a stressed (restraint stress 1 h/day, 35 days). Hippocampal slices (400 m) were pre incubated for 15 min in a tissue incubator at 37o C. Afterwards, the control slices were incubated and the OGD slices were incubated in an anaerobic chamber for 60 min at 37 oC. Then, the slices of both groups were incubated for 180 min (recovery period). The tissue damage was determined by measuring the LDH activity. Results showed that 17 estradiol was neuroprotective, with a reduction in LDH release, but it was unable to revert the stress damage.