Proteínas de baixo peso molecular do plasma seminal bovino relacionadas com a congelabilidade do sêmen através de eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida

Abstract

A eletroforese bidimensional em géis de poliacrilamida representa uma técnica valiosa para separação e caracterização das proteínas e através deste método muitas proteínas do plasma seminal de várias espécies foram descritas e caracterizadas. O objetivo do presente estudo foi relacionar o perfil das proteínas de baixo peso molecular do plasma seminal bovino com a congelabilidade do sêmen. O plasma seminal de 16 reprodutores bovinos de maior e menor congelabilidade foram utilizados neste estudo. Foram encontradas 12 bandas protéicas nas amostras de plasma seminal analisadas nos géis SDS-PAGE a 15%. Apenas 6 das 12 bandas foram detectadas em todos os ejaculados estudados, sendo que somente as bandas protéicas 3 (15-16kDa; pI 4,7-5,2), 5 (16-17kDa; pI 4,1-4,8) e 7 (10-12kDa; pI 4,8-4,9) não apresentaram variação significativa entre as amostras de plasma seminal dos reprodutores. Das proteínas analisadas neste estudo, 4 apresentaram-se quantitativamente superiores (P<0,05) nas amostras dos reprodutores pertencentes ao grupo de maior congelabilidade, as bandas 3 (15-16kDa; pI 4,7-5,2), 7 (11-12kDa; pI 4,1-4,8), 11 (13-14kDa; pI 6,90-6,50) e 23 (18-20kDa; pI 4,8-5,2), enquanto que a banda protéica 25 (25-26kDa; pI 6,0-6,5) mostrou-se significativamente superior (P<0,05) nos reprodutores de menor congelabilidade do sêmen. As evidências encontradas neste experimento mostram que existem diferenças no perfil protéico dos reprodutores com maior e menor congelabilidade do sêmen, sugerindo as proteínas 3, 7, 11, 23 como possíveis marcadores da congelabilidade do sêmen e a proteína 25 como indicativo da menor congelabilidade do sêmen.

Two-dimensional gel polyacrylamide electrophoresis represents a valuable tool for the separation and characterization of proteins from complex biological samples. Many proteins from seminal plasma of various animal have been described and characterized and 2-D PAGE has been widely used for their separation and analysis. The objectives of this study were to evaluate the low weight protein profile of bovine seminal plasma using two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2D-PAGE) and to find if any of these proteins was correlated with semen freezability. A total of 16 bull seminal plasma were used in this study. Of the 12 proteins found in the research bulls, three spots, present in all samples, 3 (15-16kDa), 5 (16-17kDa) and 7 (10-12kDa) had not a statistically significant variation among bulls, regardless the freezability group. Four proteins showed superior relative content (P<0.05) in seminal plasma samples collected from bulls with high semen freezability, than in the samples of the bulls of low semen freezability: the spots 3 (15-16kDa, pI 4.7-5.2), 7 (11-12kDa, pI 4.8-4.9), 11 (13-14kDa, pI 6.0-6.5) and 23 (20-22kDa, pI 4.8-5.2). On the other hand, the spot 25 (25-26kDa, pI 6.0-6.5) showed superior relative protein content (P<0.05) on seminal plasma samples from bulls with low semen freezability. The data found out in this study suggest protein profile differences between high and low bulls semen freezability and that the proteins 3, 7, 11 and 23 can be used as a semen freezability marker and the protein 25 would be related with low semen freezability.