Modulação endocanabinóide da evocação de memórias recentes ou remotas : efeito da infusão intra-hipocampal de AM251

Abstract

O sistema endocanabinóide tem um papel modulador sobre células excitatórias e inibitórias em diferentes áreas do sistema nervoso central (SNC), em particular naquelas envolvidas na formação, consolidação e evocação de novas memórias (Davies, Pertwee, and Riedel 2002). Os estudos mostram que a principal função dos endocanabinóides no encéfalo é a supressão da liberação de neurotransmissores como GABA e glutamato por meio da sinalização mediante mensageiros retrógrados (Fattore, Fadda, and Fratta 2007; Iversen 2003). O receptor canabinóides tipo 1 (CB1) apresenta uma alta densidade na área CA1 do hipocampo (Ashton et al. 2004; Hoffman, Riegel, and Lupica 2003). Poucos estudos têm sido realizados estudando o efeito da inibição do sistema endocanabinóide na evocação de memórias aversivas, e pouco se sabe acerca de seu efeito na evocação de memórias previamente extintas. Neste trabalho, investigamos o curso temporal dos efeitos do agonista inverso seletivo para o receptor CB1, AM251, sobre a evocação de memórias aversivas de longo prazo formadas ou extintas recente ou remotamente, bem como investigaremos os mecanismos subjacentes a eles. Assim, ratos Wistar foram treinados no condicionamento aversivo ao contexto (CAC), e alguns foram submetidos à extinção da memória e testados em três momentos diferentes. O AM251 CB1 foi administrado sempre 15 minutos antes do teste. Nossos resultados demonstraram diferentes efeitos dependentes do tempo do AM251 na evocação da memória. A infusão intra-hipocampal do AM251 antes de sessão de teste melhorou a evocação da memória de medo quando foi testada 72 horas após a sessão de treino, enquanto que a mesma dose de AM251 prejudicou a evocação da memória quando foi testada 15 dias após a sessão de treino. É importante ressaltar que quando o teste foi 30 dias após a sessão de treino o AM251 melhorou a evocação da memória. Também encontramos que quando a memória foi testada 24 horas após a sessão de extinção, o AM251 bloqueou a evocação da memória de extinção, mas, quando a sessão de extinção foi realizada 14 ou 30 dias após a sessão de treino e testada 24 horas depois, o AM251 não teve efeito. Desta forma, o efeito farmacológico da AM251 pode mudar com a extinção da memória e seu efeito é dependente do tempo. Acredita-se que o efeito oposto do AM251 sobre a evocação da memória, em diferentes momentos no tempo, é o resultado de alterações na expressão e localização do receptor CB1 em neurónios excitatórios piramidais, em interneurônios GABAérgicos ou em ambos os sistemas na região CA1 do hipocampo. Estudos de imunoistoquímica estão sendo realizados para avaliar as mudanças no número e localização dos receptores canabinóides CB1 em memórias recentes e remotas e assim fornecer uma explicação aos efeitos contraditórios na evocação da memória observados neste trabalho.

Extensive evidence indicates that the endocannabinoid system plays a modulatory role on excitatory and inhibitory neural activity in central and peripheral nervous system. The CB1 cannabinoid receptors have a high concentration in important areas related to memory modulation, such as the hippocampus-responsible for the contextual component, and infralimbic cortex-involved in the maintenance of extinction. Few studies have been conducted studying the effect of inhibition of the endocannabinoid system in the recall of aversive memories, and little is known about its effect on retrieval of memories previously extinct. Here we have studied the effects of microinfusion of the CB1 receptor antagonist AM251 into the dorsal hippocampus upon the retrieval process of an aversive memory. Accordingly, Wistar rats were trained in contextual fear conditioning (CFC), in some experiments underwent memory extinction and were tested at 3 different time points. The CB1 antagonist AM251 was administered 15 minutes prior to the retrieval session. Our results showed different time-dependent effects of the AM251 on memory retrieval. Intra-hippocampal infusions of AM251 shortly before testing session improved retrieval of contextual fear memory when it was tested 72 hours after training, whereas the same dose of AM251 impaired retrieval of the memory when it was tested 15 days after training session. Importantly, when the testing session was 30 days after the training session, the AM251 improved the retrieval of the memory. We also found that, when memory was tested 24 hours after the extinction session, the AM251 blocked the retrieval of the extinction memory, but when the extinction session was performed 14 or 30 days after the training session and tested 24 hours later, the AM251 had no effect. Thus, the pharmacological effect of AM251 can change with the extinction of memory and its effect is time dependent. It is believed that the opposite effect of AM251 on memory retrieval at different moments in time, are the result of changes in the expression and localization of the CB1 receptor in excitatory pyramidal neurons, GABAergic interneurons or both systems in the CA1 region of the hippocampus. Immunohistochemistry studies are being done to evaluate the changes in the number and location of CB1 cannabinoid receptors in different moments in time to provide an explanation for the contradictory effects observed on memory retrieval.