Estudo da associação entre polimorfismos nos genes codificadores do microrna-126 e do microrna-146a e a retinopatia diabética em pacientes com diabetes mellitus tipo 1

Abstract

Introdução: A retinopatia diabética (RD) é a principal causa de novos casos de cegueira em adultos e uma das principais complicações crônicas do diabetes mellitus (DM). Estudos sugerem que o fator genético tenha uma grande contribuição no desenvolvimento dessa patologia; entretanto, a maioria dos estudos de associação entre polimorfismos genéticos e RD tem demonstrado resultados conflitantes. Assim, a identificação de novos polimorfismos genéticos associados à RD é fundamental para uma melhor compreensão da patogênese dessa complicação crônica do DM. Neste contexto, atualmente vem se estudando polimorfismos em genes codificadores de microRNAs (miRSNPs), os quais podem alterar a biogênese desses microRNAs (miRNAs) ou suas ligações aos seus RNAs mensageiros alvos, consequentemente, modificando a expressão dos genes alvos e interferindo na susceptibilidade para desenvolver determinada patologia. Até o momento, apenas dois estudos avaliaram a associação entre os miRSNPs rs2910164 no miR-146a e rs4636297 no miR-126 e a RD. Objetivo: Avaliar a associação do miRSNP rs4636297 (G/A) no gene miRNA-126 e do miRSNP rs2910164 (G/C) no gene miRNA-146a com a RD em pacientes com DM tipo 1 (DM1). Metodologia: Foram analisados 196 casos com DM1 e RD (proliferativa ou não-proliferativa moderada ou grave) e 219 controles com DM1, mas sem RD ou com RD não-proliferativa leve. Os controles tinham que ter mais de 10 anos de DM1. Os polimorfismos de interesse foram genotipados através de ensaios de discriminação alélica por PCR em tempo real. Os padrões de herança dominante, recessivo e aditivo foram testados. Resultados: As frequências genotípicas dos polimorfismos rs4636297 (G/A) no gene miR-126 e rs2910164 (G/C) no gene miR-146a estavam em equilíbrio de Hardy–Weinberg no grupo controle. Em relação ao polimorfismo rs4636297, encontrou-se uma associação do alelo A com proteção para RD nos três modelos de herança genética: recessivo, aditivo e dominante (p = 0,023; p = 0,001 e p = 0,003; respectivamente). De modo contrário, as frequências genotípicas e alélicas do polimorfismo rs2910164 não diferiram entre casos e controles (p = 0,412 e p = 0,977; respectivamente). Também não se observou associação desse miRSNP com RD quando analisado os diferentes modelos de herança. Conclusão: O presente estudo demonstrou, pela primeira vez em uma população brasileira, a associação entre o genótipo A/A do polimorfismo rs4636297 no gene miR-126 e proteção para RD. Não foi encontrada associação entre o polimorfismo rs2910164 no gene miR-146a e a RD nesta mesma população.

Introduction: Diabetic retinopathy (DR) is the leading cause of new cases of blindness in adults and one of the main chronic complications of diabetes mellitus (DM). Studies have suggested that the genetic factor has a great contribution in the development of this pathology; however, most of the association studies between genetic polymorphisms and DR have shown conflicting results. Thus, the identification of new genetic polymorphisms associated with DR is fundamental for a better understanding of the pathogenesis of this chronic complication of DM. In this context, polymorphisms in genes encoding microRNAs (miRSNPs) have been studied since they may alter the biogenesis of the microRNAs (miRNAs) or their binding to the target messenger RNAs; thus, modifying the expression of the target genes and interfering in the susceptibility to develop a specific pathology. To date, only two studies have evaluated the association between rs2910164 on miR-146a and rs4636297 on miR-126 and DR. Objective: To evaluate the association of rs4636297 (G/A) polymorphism in the miRNA-126 gene and the rs2910164 (G/C) polymorphism in the miRNA-146a gene with DR in patients with type 1 DM (T1DM). Methods: We analyzed 196 cases with T1DM and DR (proliferative DR or moderate or severe non-proliferative DR) and 219 controls with T1DM but without DR or with mild non-proliferative DR. Control subjects had more than 10 years of T1DM. Polymorphisms of interest were genotyped using allele discrimination assays by real-time PCR. Dominant, recessive, and additive inheritance models were tested. Results: Genotype frequencies of the rs4636297 (G/A) polymorphism in the miR-126 gene and rs2910164 (G/C) in the miR-146a gene were in Hardy-Weinberg equilibrium in the control group. In relation to the rs4636297 polymorphism, the A allele was associated with DR protection in all genetic inheritance models tested: recessive, additive and dominant (P = 0.023, P = 0.001 and P = 0.003, respectively). In contrast, genotype and allele frequencies of the rs2910164 polymorphism did not differ between cases and controls (P = 0.412 and P = 0.977, respectively). Moreover, no association was found for this miRSNP when different inheritance models were analyzed. Conclusion: The present study demonstrated, for the first time in a Brazilian population, the association between the A/A genotype of rs4636297 polymorphism in the miR-126 gene and protection for DR. Conversely, no association was found between the rs2910164 polymorphism in the miR-146a gene and RD in this same population.