Análises histológicas de tecido ovariano vitrificado : ajuste do processamento histológico para distinção das alterações provocadas pela criopreservação daquelas advindas do preparo tecidual

Abstract

Introdução: Os efeitos advindos do preparo histológico podem ser interpretados como efeitos causados pela criopreservação sobre os tecidos ovarianos. Objetivo: O presente trabalho averiguou se os tecidos ovarianos sofreriam alguma alteração morfológica quando expostos a diferentes tratamentos de xilol após a criopreservação. Materiais e Métodos: Fragmentos grandes e pequenos de tecido ovariano foram vitrificados em uma cápsula metálica. Após o reaquecimento o tecido vitrificado foi cultivado por 48 horas. Durante o processamento histológico, os fragmentos frescos e vitrificados foram submetidos a três tratamentos diferentes de xilol. Resultados: Os resultados mostraram que não houve diferença significativa na qualidade do estroma de tecidos frescos e vitrificados expostos aos tratamentos de xilol. Entretanto, os fragmentos grandes vitrificados apresentaram perdas significativas na sua qualidade de estroma em comparação aos fragmentos frescos (P= 0,0218). A qualidade folicular dos tecidos frescos diminuiu com a redução do tempo de exposição ao xilol, enquanto que a qualidade folicular dos tecidos vitrificados aumentou com a diminuição do tempo de exposição ao solvente. Não houve diferenças significativas no aumento das taxas de qualidade folicular em ambos os grupos, fresco e vitrificado, após a reanálise dos dados utilizando os parâmetros da literatura para integridade folicular (P= 0,1025). Conclusão: O tecido ovariano após a criopreservação apresenta algumas alterações significativas quando exposto ao xilol, mostrando que adequações nos protocolos de técnicas histológicas devem ser realizadas.

Introduction: The effects of histological preparation can be interpreted as effects caused by cryopreservation on the ovarian tissues. Objective: The present study investigated whether ovarian tissues would undergo a morphological change when exposed to different xylol treatments after cryopreservation. Methods: Large and small fragments of ovarian tissue were vitrified in a metal capsule. After rewarming tissue samples was cultured for 48 hours. During histological processing, the fresh and vitrified fragments were submitted to three different treatments of xylol. Results: The results showed that there was no significant difference in the stromal quality of fresh and vitrified tissues exposed to xylol treatments. However, large vitrified fragments showed significant losses in their stromal quality compared to fresh fragments (p = 0.0218). The follicular quality of the fresh tissues decreased with the reduction of the time of exposure to xylol, whereas the follicular quality of the vitrified tissues increased with the decrease of the time of exposure to the solvent. There were no significant differences in the increase in follicular quality rates in both fresh and vitrified groups after the reanalysis of the data using the literature parameters for follicular integrity (p = 0.1025). Conclusion: The ovarian tissue after cryopreservation presents some significant changes when exposed to xylol, showing that adequacies in the protocols of histological techniques should be performed.