Análise comparativa dos genes codificadores de AgB em duas espécies do gênero Echinococcus (Rudolphi, 1801) e elucidação da distribuição das mesmas no estado do RS

Abstract

Os parasitos do gênero Echinococcus apresentam uma grande diversidade genética. A espécie E. granulosus apresenta uma grande variação intraespecífica. Seus haplótipos têm características morfológicas e epidemiológicas únicas, sendo adaptados a hospedeiros intermediários distintos. Mesmo com os recentes esforços a taxonomia do gênero permanece em discussão. Os genes do antígeno B (AgB) de Echinococcus compõem uma família multigênica. A proteína secretada tem papel importante no estabelecimento do cisto hidático, modulando a resposta imune do hospedeiro. O propósito do presente trabalho foi dar continuidade à caracterização da variabilidade dos genes do AgB de Echinococcus, na fase larval e adulta do parasito. Este trabalho também pretendeu responder qual a freqüência das espécies E. granulosus e E. ortleppi em cistos férteis de bovinos. Cistos hidáticos de ambas as espécies, apresentaram sequências de EgAgB8/4 formando dois conjuntos claramente distintos. É provável que os “primers” utilizados tenham amplificado o gene EgAgB8/2 não funcional de E. ortleppi, a exceção do clone G5-10 que parece ser uma seqüência autêntica de EgAgB8/4. E. ortleppi talvez não possua o gene EgAgB8/4 funcional. A análise dos cinco genes do AgB, a partir de um único verme adulto identificado como E. granulosus (G1), mostrou que a variabilidade encontrada é menor do que a relatada no mesmo organismo em sua fase larval, a exceção do gene EgAgB8/3. Nós acreditamos que a redução no número de variantes encontradas no verme adulto esta ligado ao baixo nível de expressão do AgB e com o menor papel na sobrevivência do verme adulto. Surpreendentemente, sequências obtidas do gene EgAgB8/2 neste verme adulto, são idênticas às descritas para E. ortleppi. Nós acreditamos que ele seja resultado de fecundação cruzada entre as espécies E. granulosus e E. ortleppi. A amostragem de cistos férteis no período de 2001 a 2008 mostrou que o rebanho de bovinos do Rio Grande do Sul esta sendo invadido pela espécie E. ortleppi em detrimento de E. granulosus.

Parasites belonging to the genus Echinococcus have a large genetic diversity. The E. granulosus species shows a high intraspecific variability. Its haplotypes have particular morphological and epidemiologic features, being adapted to distinct intermediate hosts. Even with recent efforts, the genus taxonomy remains under discussion. The Echinococcus antigen B (AgB) genes belong to a multigene family. The secreted protein has an important role in cyst establishment, modulating host immune responses. The aim of the present study was a further characterization of Echinococcus´ AgB gene variability, in larval and adult stages of the parasite. This work also aimed to answer what is the frequency of E. granulosus and E. ortleppi in bovine fertile cysts. Cysts from both species, showed EgAgB8/4 sequences that belong to two clearly distinct clusters. It is likely that the primers used amplified a non-functional EgAgB8/2 gene of E.ortleppi, excepting clone G5-10, that seems to be an authentic sequence EgAgB8/4. E. ortleppi might not have a functional EgAgB8/4. The analysis five AgB genes from a single adult worm identified as E. granulosus (G1) showed a lower variability than reported for in its larval stage, excepting EgAgB8/3. We believe that the reduction in the number of variants found in this adult worm is linked to the low level of AgB expression and with its smaller role in the adult worn survival. Surprisingly sequences obtained for EgAgB8/2 in this adult worn, are identical described for E. ortleppi. We believe that it is a result of a cross fertilization between E. granulosus and E. ortleppi. The sampling of bovine fertile cysts during years 2001-2008 showed that the cattle herd of Rio Grande do Sul is being invaded by E. ortleppi in detriment of E. granulosus.