Determinação do perfil de expressão dos marcadores imunofenotípicos em plaquetas de doadores do Banco de Sangue do Hospital de Clínicas de Porto Alegre

Abstract

Introdução: Através da Imunofenotipagem por Citometria de fluxo, os diferentes antígenos plaquetários podem ser identificados com o uso de anticorpos monoclonais específicos. Dentre as varias glicoproteínas específicas de membrana associadas às plaquetas destacam-se a GPIIb(CD41a), GPIX(CD42a), GPIb(CD42b), e GPIIIa(CD61). Diversas patologias associadas à disfunção plaquetária podem ser identificadas através da avaliação da expressão de diferentes marcadores imunofenotípicos, entretanto, pouco se sabe sobre os níveis normais de expressão destes marcadores na população sadia. Objetivo: Determinar o perfil de expressão dos marcadores imunofenotípicos associados às plaquetas, por técnica Citometria de fluxo em indivíduos sadios. Metodologia: Foi avaliada a expressão dos marcadores plaquetários de 30 amostras de doadores voluntários do banco de sangue através da análise imunofenotípica seguindo um painel específico (CD41, CD42a, CD42b e CD61). As amostras foram analisadas no Citômetro de Fluxo FACSCantoTM II (Becton, Dickinson, San Jose, CA). Para análise das Intensidades médias de fluorescência (IMF) foi utilizado o software Infinicyt™ (Cytognos SL, Salamanca, Spain). Após a implantação da técnica foram analisados três pacientes com suspeitas de Bernard Soulier para a validação da detecção de deficiência destes marcadores. Resultados: A IMF dos marcadores CD41, CD42a, CD42b e CD61 nas plaquetas foram de 83,53±15,44, 75,33±10,79, 155,18±23,81 e 44,92±8,32, respectivamente. Foi possível correlacionar os resultados com os valores dos pacientes com disfunção plaquetária, sugerindo que dois eram de fato portadores de Bernard Soulier. Conclusão: Este estudo permitiu realizar a padronização da técnica de marcação plaquetária, evidenciando uma heterogeneidade na IMF de antígenos plaquetários em indivíduos sadios. Foi possivel auxiliar no diagnóstico de dois pacientes com disfunções plaquetárias e excluir uma suspeita. Estes achados demonstram a importância de conhecer a expressão destes marcadores em um grupo controle, possibilitando futuros estudos para aplicação em pacientes com disfunções plaquetárias.