Avaliação da administração de dexametasona sobre os níveis de citocinas inflamatórias em animais submetidos ao kindling por pentilenotetrazol

Abstract

A epilepsia é uma desordem neurológica caracterizada por crises convulsivas espontâneas e recorrentes que afeta mais de 50 milhões de pessoas no mundo. O tratamento com fármacos anticonvulsivantes é limitado e cerca de 30% dos pacientes não respondem satisfatoriamente à terapia. Nessa situação, a remoção cirúrgica do foco epiléptico é muitas vezes a única opção terapêutica para alcançar o controle das crises. Diversos estudos demonstraram a influência da inflamação sobre o processo epileptogênico. A dexametasona é um glicocorticóide sintético usado principalmente por seus potentes efeitos anti-inflamatórios, e tem sido demonstrado a sua ação inibitória sobre a atividade epiléptica. Neste estudo, avaliou-se o efeito da administração de dexametasona na concentração de citocinas inflamatórias (TNFα e IL-1β), em ratos submetidos ao modelo do kindling induzido por pentilenotetrazol (PTZ). Ratos Wistar machos foram divididos em cinco grupos (n=10 por grupo) e receberam salina (NaCl 0,9 %), diazepam (2 mg/Kg) ou diferentes doses de dexametasona (1, 2 e 4 mg/Kg), via intraperitoneal, diariamente, durante 15 dias e, em dias alternados, também receberam doses subconvulsivantes de pentilenotetrazol (PTZ) (20 mg/Kg/mL). Ao final do experimento, eles foram sacrificados e coletaram-se amostras de soro, hipocampo e córtex.Nos dias em que receberam o PTZ, os animais foram observados durante 30 minutos e a intensidade das convulsões foi classificada de acordo com a escala de Racine. Os animais tratados apresentaram redução na intensidade das convulsões frente ao grupo salina, (p<0,005; OneWayANOVA; post hoc Dunnet). Na determinação das citocinas por ELISA houve diminuição significativa no nível de IL-1β nos grupos tratados com diazepam e com 1 e 4 mg/Kg de dexametasona (P<0,005; OneWayANOVA; post hoc Tukey). Não houve diferença significativa no córtex e nas amostras de soro foi indetectável. Na determinação de TNFα observou-se diminuição significativa no soro, córtex e hipocampo de animais tratados com a maior dose de dexametasona (4 mg/Kg) quando comparados ao grupo controle salina (p<0,05, ANOVA de uma via, post hoc Dunnet). Este trabalho identificou a ação modulatória do glicocorticóide dexametasona sobre os níves de TNFα e IL-1β e a consequente diminuição na intensidade das crises convulsivas, demonstrando o grande potencial desse medicamento como um auxiliar para tratamento de epilepsia refratária.

Epilepsy is a neurological disorder characterized by spontaneous and recurrent seizures that affects more than 50 million people in the world. The treatment with anticonvulsants drugs is limited and about 30% of the patients do not respond satisfactorily to the therapy. Under these circumstances, the surgical removal of the epileptic focus is often the only therapeutic option to achieve seizure control. Several studies demonstrated the influence of the inflammation on the epileptogenic process. Dexamethasone is a synthetic glucocorticoid used mainly due to its potent anti-inflammatory effects, and an inhibitory effect on the epileptic activity has been showed. In this study, the effect of the administration of dexamethasone on the concentration of inflammatory cytokines (TNFα e IL-1β) was evaluated in rats submitted to the kindling model induced by pentylenotetrazole (PTZ). Males Wistar rats were divided in five groups (n=10 per group) and received saline (NaCl 0,9%), diazepam (2 mg/Kg) or different doses of dexamethasone (1, 2 and 4 mg/Kg) via intraperitoneal, daily, for 15 days and, every other day, they received subconvulsants doses of pentylenotatrazole (PTZ) (20 mg/Kg/mL). At the end of the experiments, the rats were sacrificed and cortex, hippocampus and serum samples were collected. In the days when PTZ was administered, the animals were observed during 30 minutes and the seizures intensity was classified according to Racine Scale. Treated animals displayed reduced seizure intensity compared to the saline group (p<0,005; OneWayANOVA; post hoc Dunnet). Cytokines determination by ELISA, a significant reduction was observed in IL-1β level in the groups treated with diazepam and with 1 and 4 mg/Kg of dexamethasone (P<0,005; OneWayANOVA; post hoc Tukey). There was no significant difference was observed in the cortex and it was undetectable in the serum samples. For the TNFα determination, it was observed a significant reduction in the serum, cortex and hippocampus of animals treated with the highest dose of dexamethasone (4 mg/Kg) when compared to the saline control group (p<0,005, one-way ANOVA, post hoc Dunnet). This work has identified the modulatory action of the glucocorticoid dexamethasone on the TNFα and IL-1β levels and the consequent diminishment in the intensity of seizures, demonstrating the great potential of this drug to assist in the treatment for refractory epilepsy.