Sensibilidade do método de ensaios de toxicidade aguda com embriões de peixes na avaliação de efluente de indústria metalmecânica

Abstract

Efluentes industriais são uma fonte poluidora de corpos hídricos que podem ter sua toxicidade potencializada pela interação dos elementos que os compõem. Devido a isso, ensaios ecotoxicológicos são uma importante ferramenta no intuito de simular os efeitos que um determinado efluente pode provocar em organismos de diferentes níveis tróficos, como alga, microcrustáceo ou peixe. O uso de vertebrados para fins científicos traz um forte debate quanto à utilização de peixes como organismo-teste nesses ensaios. Assim, o Ensaio de Toxicidade com Embrião de Peixe (FET - Fish Embryo Toxicity Test) tem sido altamente difundido por ser considerado um método alternativo ao uso de peixes nas fases juvenil e adulta em ensaios ecotoxicológicos e estar em concordância com o princípio dos 3R’s (Replacement - substituição; Reduction - redução e Refinement - refinamento) presente na legislação europeia. Contudo, a permeabilidade do córion do embrião e seu papel como uma possível barreira a substâncias de alto peso molecular ou com elevado potencial tóxico ainda não estão completamente esclarecidas. Assim, considerando as limitações do método, com o propósito de avaliar sua sensibilidade, este trabalho utiliza quatro amostras de efluentes de uma indústria metalmecânica para avaliar suas respectivas toxicidades agudas utilizando embriões de peixe da espécie Danio rerio, de acordo com a norma OECD 236 (OECD, 2013). Os resultados de toxicidade aguda para o FET foram comparados com os resultados apresentados por três outros organismos-teste (alga, microcrustáceo e peixe na fase larval) A comparação realizada visou avaliar se embriões de peixe seriam tão sensíveis quanto outros organismos-teste, considerando que a legislação brasileira CONAMA 430 exige a utilização de apenas dois níveis tróficos na realização de ensaios ecotoxicológicos para monitoramento ambiental no descarte de efluentes. Além disso, dois períodos de exposição (48 e 96 horas) foram analisados para os ensaios com embriões de D. rerio. Embriões de D. rerio se mostraram bons modelos na detecção da toxicidade aguda dos efluentes analisados, se apresentando sempre igual ou mais sensível que os demais organismos-teste utilizados. Os ensaios com embriões não apresentaram diferença significativa na toxicidade observada com o tempo de exposição de 48h e 96h, indicando que o córion não serviu como uma barreira ao efeito das substâncias presentes no efluente. Contudo, se faz importante ressaltar que a extensão do ensaio até 96h permite a observação de efeitos sub-letais importantes na complementação da leitura do ensaio.

Industrial effluents are a polluting source of water bodies that may have their toxicity enhanced by the interaction of the elements composing them. Due to this issue, ecotoxicological tests are an important tool in order to simulate the effects that a given effluent can cause in organisms of different trophic levels, such as alga, microcrustacean or fish. The use of vertebrates for scientific purposes brings a strong debate about the use of fish as a test organism in these tests. Thus, the Fish Embryo Toxicity Test (FET) has been widely disseminated because it is considered an alternative method for the use of juvenile and adult fish in ecotoxicological assays and is in accordance with the principle of 3R's (Replacement, Reduction and Refinement) in European legislation. However, the permeability of the embryo chorion and its role as a possible barrier to substances of high molecular weight or elevated toxic potential are not yet fully understood. Considering the limitations of the method, in order to evaluate its sensitivity, this paper uses four effluent samples from a metal-mechanical industry to evaluate their respective acute toxicities using fish embryos of the Danio rerio species according to the OECD standard 236 (OECD, 2013). The acute toxicity results for FET were compared with the results presented by three other test organisms (seaweed, microcrustacean and fish in the larval phase) The comparison carried out was aimed at evaluating whether fish embryos would be as sensitive as other test organisms, considering that the Brazilian legislation CONAMA 430 requires the use of only two trophic levels in the conduct of ecotoxicological assays for environmental monitoring in the disposal of effluents. In addition, two exposure periods (48 and 96 hours) were analyzed for D. rerio embryos. The embryos proved to be a good model for detecting the acute toxicity of the analyzed effluents, always being equal to or more sensitive than the other test organisms used. Embryo assays showed no significant difference in the toxicity observed with the exposure time of 48h and 96h, indicating that the chorion did not serve as a barrier to the effect of the substances present in the effluent. However, it is important to note that the extension of the assay up to 96h allows observation of significant sub-lethal effects in complementing the assay reading.