Doença pulmonar obstrutiva crônica e terapia com células-tronco mesenquimais : estudos in vitro sobre a ativação das células-tronco na presença de células de pacientes com diferentes perfis inflamatórios

Abstract

Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica (DPOC) é caracterizada pela diminuição progressiva do fluxo de ar nas vias aéreas. Se o paciente necessitar alterar seu tratamento devido sua piora clínica, diz-se que ele está em exacerbação. O paciente, durante os diferentes estágios da DPOC, apresenta perfis inflamatórios distintos. Devido ao caráter inflamatório da doença, células-tronco mesenquimais (MSC) são estudadas como alternativa terapêutica por serem capazes de imunomodular o microambiente em que se encontram, através da secreção de citocinas. O objetivo do trabalho foi estudar a capacidade das MSC de serem estimuladas quando em cultura com o soro de pacientes com DPOC em diferentes situações clínicas e em co-cultura com as PBMC desses pacientes. Para tal, as PBMC dos pacientes foram isolados e co-cultivados com MSC, assim como as MSC foram cultivadas em meio contendo soro desses pacientes. Após 48 horas em cultura, extraiu-se RNA das MSC para quantificar a expressão gênica de ciclooxigenase-2 (COX-2) e hemeoxigenase-1 (HO-1) através de qRT-PCR. A expressão de COX-2 no grupo de MSC cultivadas com o soro de pacientes com DPOC exacerbados e das MSC co-cultivadas com PBMC de pacientes exacerbados foi quase 15 vezes maior (p= 0,043). Não se observou diferença estatística na expressão da HO-1. Em ambas as avaliações, a ausência de diferença estatística pode ser devido ao baixo número de indivíduos no estudo. Novas avaliações são necessárias para estabelecer a relação entre a capacidade imunomodulatória das MSC e a expressão de COX-2 e HO-1 e o perfil inflamatório da DPOC.

Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD) is characterized by a progressive reduction of airflow in the airways. If the patient need to change your treatment because your clinical worsening, it is said that it is in exacerbation. The patient, during the different stages of COPD, presents distinct inflammatory profile. Due to the inflammatory nature of the disease, mesenchymal stem cells (MSCs) have been studied as an alternative therapy to be able to immunomodulation the microenvironment in which they are, by secreting a variety of cytokines. The objective was to study the ability of the MSC to be stimulated in culture with the serum of COPD patients in different clinical settings and in co-culture with PBMC of these patients. To this end, the PBMC of patients were isolated and co-cultured with MSCs were cultured with serum from patients. After 48 hours in culture, RNA was extracted from MSC to quantify the gene expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) and hemeoxigenase-1 (HO-1) by qRT-PCR. COX-2 expression in the MSC group cultured with serum from patients with exacerbated COPD and MSCs co-cultured with PBMCs from patients exacerbated was almost 15 times higher (p = 0.043). There was no statistical difference in the expression of HO-1. In both evaluations, the absence of statistical difference may be due to the low number of individuals in the study. New evaluations are needed to establish the relationship between the immunomodulatory capacity of MSC and COX-2 expression and HO-1 and inflammatory profile of COPD.